期刊简介
1995年创刊，中华人民共和国卫生部主管，中华医学会、国际医药卫生导报社主办。本刊是综合性医学学术期刊，主要栏目：科研课题、基础研究、专家述评、临床研究、病例报告、药物与临床、药学研究、临床检验、中医中药、预防医学、护理研究、医学动态等。
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- 杂志名称：国际医药卫生导报杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会;国际医药卫生导报社
- 国际刊号：1007-1245
- 国内刊号：44-1417/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中)
应用McMSP分析Rassfla启动子区域甲基化
谭俊青；钮心怡
关键词：实时荧光定量PCR, 熔解曲线分析, DNA甲基化, SYBR.Green.I
摘要：目的 应用McMSP分析抑癌基冈Rassfla启动子区域甲基化,同时比较MSP与McMSP之间的异同.方法 (1)对常规甲基特异性PCR(MSP)扩增后的产物进行熔解曲线分析(MCA);(2)将SYBR Green I直接加入PCR反应前体系进行扩增;(3)探索McMSP分析的灵敏度,将标本按1:10、1:100、1:500、1:1 000、1:5 000、1:10 000稀释后,分别行MSP和MeMSP.结果 (1)不应用商业试剂盒同时将SYBR Green I浓度降低,仍能获得较好结果;(2)Q-PCR MCA能将完全甲基化和完全未甲基化DNA标本区分;(3)在将DNA标本1:10 000稀释后(DNA量＜2pg)仍可以检测到所需要的目的产物,而常规MSP在1:100稀释(DNA量＞100pg)时就已不能检测到产物;(4)McMSP区分正常癌旁组织和癌组织的能力较常规MSP大大增强.结论 利用Q-PCR MCA分析Rassfla启动子区域甲基化迅速准确,操作简便,结果以曲线形式给出,具有较常规MSP更高的灵敏度和区分能力.
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