期刊简介
1995年创刊，中华人民共和国卫生部主管，中华医学会、国际医药卫生导报社主办。本刊是综合性医学学术期刊，主要栏目：科研课题、基础研究、专家述评、临床研究、病例报告、药物与临床、药学研究、临床检验、中医中药、预防医学、护理研究、医学动态等。
往期目录
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
-
2019
首页>国际医药卫生导报杂志
- 杂志名称：国际医药卫生导报杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会;国际医药卫生导报社
- 国际刊号：1007-1245
- 国内刊号：44-1417/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中)
人凝血因子IX在毕赤酵母中的表达及活性测定
戴永刚；刘新风
关键词：人凝血因子IX(hFIX), 毕赤酵母, 蛋白表达
摘要：目的 人凝血因子IX(hFIX蛋白)在人类内源性凝血过程中起着非常重要的作用.hFIX表达量绝对或相对不足会导致B型血友病.本研究用毕赤酵母生产重组hFIX.方法 首先用RT-PCR将人肝脏hFIX的mRNA进行扩增、测序并插入到pPIC9K中载体,构建pPIC9K-hFIX酵母分泌表达载体,再将pPIC9K-hFIX电转化进入毕赤酵母SMD1168,然后通过G418抗药性能力的大小筛选获得高拷贝且表达量高的重组菌株.结果 通过SDS-PAGE和免疫印迹分析表明本研究获得的重组毕赤酵母hFⅨ表达量达到100 mg/L；经过阴离子交换和半透膜扩散透析得到纯化的蛋白.检测重组hFⅨ的比活力,约为天然hFIX凝血活性的5.5％.结论 我们可以优化找到更好的生产条件,使用其他比SMD1168更好的菌株,以获取更好生产量和质量；另外,我们也有很多可以增强在酵母生产的hFIX的活性.
友情链接