期刊简介
1995年创刊，中华人民共和国卫生部主管，中华医学会、国际医药卫生导报社主办。本刊是综合性医学学术期刊，主要栏目：科研课题、基础研究、专家述评、临床研究、病例报告、药物与临床、药学研究、临床检验、中医中药、预防医学、护理研究、医学动态等。
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首页>国际医药卫生导报杂志
- 杂志名称：国际医药卫生导报杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会;国际医药卫生导报社
- 国际刊号：1007-1245
- 国内刊号：44-1417/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中)
miRNA靶向调控CCR7抑制结肠癌细胞增殖及侵袭的研究
林汉利；陈小欢；王晓玲；曾浩涛
关键词：CCR7基因, 结肠癌, miRNA, 双荧光素酶报告系统
摘要：目的 探讨miRNA在调控趋化因子受体CCR7表达及对结肠癌细胞增殖及侵袭的影响.方法 利用生物信息学网站Target Scan、Pictar和miRanda,综合文献寻找与CCR7基因相互作用的miRNA,综合3个数据库和文献的结果选取5条miRNA分别为miR-let7、miR-21、miR-98、miR-145、miR-642研究.使用PCR方法扩增含CCR7基因3’-UTR区序列插入到双酶切的双荧光素酶报告载体中,使用lipofectamine2000转染试剂将报告载体和待筛选miRNA共转染293细胞,双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性.用迁移和transwell小室实验检测所预测的miRNA对结肠癌HCT116细胞转移和侵袭能力的影响.用Western blotting检测miRNA作用于结肠癌HCT116细胞后对CCR7蛋白表达的调控.结果 得到含CCR7基因3’-UTR序列的双荧光素酶报告重组质粒,并用凝胶电泳和基因测序的方法验证.CCR7基因3’-UTR上有miRNA的调控作用靶点;双荧光素酶报告显示miR-let7、miR-21组比空白对照组CCR7基因3’-UTR双荧光素酶基因报告载体的荧光素酶活性下降.miR-let7、miR-21能显著抑制结肠癌HCT116细胞迁移和侵袭能力,并且下调CCR7蛋白在HCT116细胞中的表达.结论 CCR7基因3’-UTR段双荧光素酶基因报告载体构建成功,miRNA(miR-let7和miR-21)对CCR7有负调控作用.miR-let7和miR-21能抑制CCR7蛋白的表达,并抑制结肠癌细胞转移和侵袭能力.
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