期刊简介
1995年创刊，中华人民共和国卫生部主管，中华医学会、国际医药卫生导报社主办。本刊是综合性医学学术期刊，主要栏目：科研课题、基础研究、专家述评、临床研究、病例报告、药物与临床、药学研究、临床检验、中医中药、预防医学、护理研究、医学动态等。
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首页>国际医药卫生导报杂志
- 杂志名称：国际医药卫生导报杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华医学会;国际医药卫生导报社
- 国际刊号：1007-1245
- 国内刊号：44-1417/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中)
CCR7重组慢病毒的构建及其表达对结肠癌细胞侵袭的影响
林汉利；陈小欢；王晓玲；曾浩涛
关键词：CCR7基因, 慢病毒, 结肠癌, 细胞迁移, 细胞侵袭
摘要：目的 构建含有CCR7的重组基因工程慢病毒,并转导结肠癌HT29细胞,高效表达CCR7蛋白,并研究趋化因子受体CCR7的表达在人结肠癌HT29细胞体外转移中的作用.方法 提取HT29细胞的RNA,RT-PCR扩增CCR7基因,克隆至慢病毒载体pLVX-acGFP-N1,形成重组慢病毒载体pLVX-acGFP-CCR7,转染293T细胞,得到慢病毒LV-CCR7,转导慢病毒LV-CCR7至HT29细胞,经puromycin筛选10 d.提取细胞的RNA,QPCR检测CCR7基因相对表达量的变化.划痕和Transwell小室实验分别检测HT29细胞和CCR7过表达细胞迁移和侵袭能力的差异.Western blotting检测CCR7蛋白和MMP-9蛋白相对表达量.结果 酶切和测序都表明CCR7克隆至慢病毒载体,慢病毒成功转导至HT29细胞,QPCR检测HT29细胞中CCR7表达升高了15.4倍,Western blotting检测CCR7蛋白表达上升了4.7倍.CCR7过表达的HT29细胞向划痕处爬行的速度明显快于HT29细胞对照组;过表达CCR7的HT29细胞透过膜的数量高于普通HT29细胞.过表达CCR7的HT29细胞与细胞侵袭转移相关的基质金属蛋白酶表达量显著高于普通HT29细胞.结论 利用含有CCR7的重组基因工程慢病毒成功构建了高效表达CCR7蛋白的结肠癌HT29细胞.研究发现高效表达的CCR7能促进结肠癌HT29细胞的体外迁移侵袭能力,增强了基质金属蛋白酶的表达.
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